注册 登录  
 加关注
   显示下一条  |  关闭
温馨提示!由于新浪微博认证机制调整,您的新浪微博帐号绑定已过期,请重新绑定!立即重新绑定新浪微博》  |  关闭

漫步云端,我心飞翔

再美好的生活,也离理想有一定的距离;再快捷的前进步伐,也赶不上飞翔的速度!

 
 
 

日志

 
 
关于我

国内知名重点大学法学硕士,曾经长期从事经济体制改革、金融证券监管、融资担保、扭亏增盈、生产运行、机关文秘等方面工作,发表了大量经济学论文和专著,并曾经长期在企业一线学习、服务,主要在企业战略、市场营销、调查研究、人力资源管理、招商引资、融资担保、方案制定、信息共享、法律咨询、写作指导与服务等方面为企业提供服务。

网易考拉推荐

广东省中药配方颗粒质量标准研究规范  

2012-07-04 21:49:58|  分类: 生物制药 |  标签: |举报 |字号 订阅

  下载LOFTER 我的照片书  |

广东省中药配方颗粒质量标准研究规范

(试行)

 

 

 

示范性品种何首乌配方颗粒

Heshouwu Peifangkeli

【来源】 本品为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根制成的配方颗粒。

【炮制】 应符合《中国药典》2005年版一部何首乌饮片【炮制】项下的规定。

【制法】 略

【性状】 本品为棕黄色至红棕色的颗粒;气微,味微苦。

【鉴别】 取本品粉末0.25g,加乙醇50ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.25g,加乙醇50ml,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各2μl,分别点于同一硅胶H薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(7∶3)为展开剂,展至约3.5cm,取出,晾干,再以三氯甲烷-甲醇(20∶1)为展开剂,展至约7cm,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。

【检查】应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版一部附录Ⅰ C)。

【指纹图谱】 照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适应性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm,内径为4.6mm,粒径为5μm);以甲醇为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行洗脱;检测波长为254nm;柱温为30℃;流速为每分钟1.0ml。理论板数按2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于5000。

 

 

 

 

时间(分钟)         流动相A(%)        流动相B(%)

      0~5                   15                      85

      5~35                15~60                 85~40

     35~50                60~95                  40~5

     50~60                  95                       5

     参照物溶液的制备  取何首乌对照药材1g,过2号筛,置锥形瓶中,精密加入乙醇25ml,称定重量,超声处理30分钟,放置室温,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

    供试品溶液的制备  取本品1g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入乙醇25ml,称定重量,超声处理30分钟,放置室温,用乙醇补足减失的重量,滤过,取续滤液,即得。

测定法  分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10?l,注入液相色谱仪,测定,即得。


1


 供试品指纹图谱中应分别呈现与参照物色谱峰保留时间相同的色谱峰。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算,供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0.90;


 3


4


  2



                             对照指纹图谱

4个共有峰中  峰1:2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷  峰2:为大黄酸   峰3:为大黄素   峰4:为大黄素甲醚

【浸出物】 取本品粉末2g,精密称定,精密加入乙醇100ml,照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅹ A)测定,不得少于32.0%。

【含量测定】 避光操作。照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适应性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(25∶75)为流动相;检测波长为320nm。理论板数按2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备  取2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,即得。

供试品溶液的制备  取本品粉末约0.2g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入稀乙醇50ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率50KHz)40分钟,放冷,再称定重量,加稀乙醇补足减失的重量,摇匀,离心,即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品按干燥品计算,每袋含2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷(C20H22O9)不得少于28mg。

【性味与归经】 苦、甘、涩,微温。归肝、心、肾经。

【功能与主治】 解毒,消痈,润肠通便。用于瘰疬疮痈,风疹瘙痒,肠燥便秘;高血脂。

【用法与用量】 供配方用,遵医嘱。

【规格】 每袋装*g(相当于饮片*g)

【贮藏】 密封。

 

 

何首乌配方颗粒质量标准起草说明

 

【名称】  中文名:何首乌配方颗粒

汉语拼音:Heshouwu Peifangkeli

【来源】 本品为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根。

【炮制】 与《中国药典》2005年版一部何首乌饮片【炮制】项下一致。

【制法】 略

【性状】 根据10批样品实际描述,如正文。

【鉴别】 参考《中国药典》2010年版一部何首乌鉴别项(2)项下制定,并对三批样品进行鉴别,结果薄层色谱斑点清晰,重现性较好,拟列入正文作为本品的鉴别方法。具体说明如下:

1、试药与试剂

何首乌对照药材:批号为120934-200608,购于中国药品生物制品检定所;

供试品:批号0901021、0905019、0908090,由广东一方制药有限公司提供;

薄层板:硅胶H板(青岛)、硅胶G板(Merck)。

试剂均为分析纯

2、实验记录

供试品溶液制备:取本品粉末0.25g,加乙醇50ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。

对照药材溶液制备:取何首乌对照药材0.25g,同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

薄层板:硅胶H板;

点样量:各2μl;

点样方式:条带点样;

展开剂:以三氯甲烷-甲醇(7∶3)为展开剂,展至约3.5cm,取出,晾干,再以三氯甲烷-甲醇(20∶1)为展开剂,展至约7cm;

显色及检视:置紫外光灯(365nm)下检视;

结果:供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点(见图1)。

 

 

 

 

 

 

 


溶剂前沿


        


T:26℃   RH:72%

 

1.供试品(0901021)

2.供试品(0905019)

3.供试品(0908090)

4.何首乌对照药材



 

 

 

 

      

                            


 1   2    3    4



 图1. 何首乌配方颗粒薄层鉴别色谱图

3、鉴别方法的优化

3.1 对照药材提取方法考察

由于何首乌配方颗粒采用水提取,为了使对照药材与供试品提取方法对应,因此,本研究对对照药材分别采用两种提取方法进行比较,具体如下:

    方法①:取何首乌对照药材0.25g,加乙醇50ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解。

    方法②:取何首乌对照药材0.5g,加水100ml,煎煮1小时,滤过,滤液蒸干,加乙醇50ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解。

 结果表明,采用上述两种方法提取的对照药材的色谱主斑点一致,无明显差异,均能达到鉴别要求,从操作简便及节约能源方面考虑,拟选用方法①作为对照药材的提取方法较为适合(见图2)。

 

 

 

 

 

 

 

 


溶剂前沿




T:26℃  RH:72%

 

1.供试品(0901021)

2.何首乌对照药材(方法①)

3.何首乌对照药材(方法②)



 

 

 

 

 

 


 1    2    3 



图2. 对照药材提取方法的考察  

3.2 薄层板的比较

本研究分别对硅胶H板(青岛)和硅胶G板(Merck板)进行比较,结果表明,硅胶G板(Merck板)色谱图分离度更好,斑点相对更集中,效果更佳(见图3),因此Merck板可替代硅胶H板使用。

 


溶剂前沿

 

 

 

   1. 供试品(0901021)

   2. 何首乌对照药材

 

 

 


1    2     


1    2     



(硅胶G Merck板)    (硅胶H青岛板)

图3.不同薄层板适用性试验

【指纹图谱】  本方法参考文献报道的方法制定。

1、仪器与材料

仪器:Agilent 1100系列,Waters高效液相色谱仪;色谱柱:Ecosil HPLC COLUM C18(4.6×250mm,5?m),CAPCELL PAK C18(4.6×250mm,5?m),Phenomenex (4.6×250mm,5?m);Millipore 纯水仪。

对照药材:何首乌(批号:120934-200608 )。

试剂:甲醇为色谱纯,乙醇为分析纯。

2、色谱条件与系统适应性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm,内径为4.6mm,粒径为5μm);以甲醇为流动相A,以水为流动相B,按下表1中的规定进行洗脱;检测波长为254nm;柱温为30℃;流速为每分钟1.0ml。理论板数按2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于5000。

表1  何首乌配方颗粒指纹图谱HPLC流动相梯度

时间(分钟)         流动相A(%)        流动相B(%)

      0~5                   15                      85

      5~35                15~60                 85~40

     35~50                60~95                  40~5

     50~60                  95                       5

  

 3、溶液的制备

    3.1参照物溶液的制备  取何首乌对照药材1g,过2号筛,置锥形瓶中,精密加入乙醇25ml,称重,超声处理30分钟,放置室温,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

    3.2供试品溶液的制备  取本品1g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入乙醇25ml,称重,超声处理30分钟,放置室温,用乙醇补足减失的重量,滤过,取续滤液,即得。

测定法  分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10?l,注入液相色谱仪,测定,即得。

 


1


 


4


 3


  2



                        图4  对照指纹图谱


1


 4


3


 2



峰1为二苯乙烯苷,峰2为大黄酸,峰3为大黄素,峰4为大黄素甲醚

图5 样品指纹图谱

 

表2  相似度测定结果

序号                      相似度                

          S1                         0.973               

          S2                         0.999

          S3                         0.999

          S4                         0.999

          S5                         0.999

          S6                         0.999

 

3.3 方法与结果

分别对Agilent 1100系列高效液相色谱仪与Waters高效液相色谱仪和不同品牌子色谱柱的考查,现将结果说明如下:

3.3.1不同机相同牌子的同一色谱柱

  Agilent 1100系列高效液相色谱仪与Waters高效液相色谱仪(峰S1~S6为Agilent,峰S7~S12为Waters)

                       


  1


3


4


 2



                         图6  不同仪器的适用性考察

 

表3  不同仪器相似度比较结果

序号                   相似度      

               S1                       1

               S2                       1

S3                       1

S4                       1

S5                       1

               S6                       1

               S7                       1

               S8                       1

               S9                       1

               S10                      1

               S11                      1

S12                      1

 由上表可知,该方法对不同牌子不同型号的高效液相色谱仪的适应性好。

3.3.2、相同仪器不同牌子色谱柱

Ecosil HPLC COLUM C18(4.6×250mm,5?m),CAPCELL PAK C18(4.6×250mm,5?m)与Phenomenex (4.6×250mm,5?m)(峰S1~S6为CAPCELL PAK C18,峰S7~S12为Ecosil HPLC COLUM C18,峰S13~S18为Phenomenex C18)

 


4


3


2


  1



                      图7 不同牌子色谱柱适用性考察

表4   不同牌子色谱柱相似度比较结果

序号                 相似度

              S1                      1

              S2                      1

              S3                      1

              S4                      1

              S5                      1

              S6                      1

              S7                      1

              S8                      1

              S9                      1

              S10                     1

              S11                     1

              S12                     1

              S13                     1

              S14                     1

              S15                     1

              S16                     1

              S17                     1

              S18                     1

由上表可知,该方法对不同牌子色谱柱的适应性好。

另外曾选用Thermo ODS Hypersil C18色谱柱,结果发现在与大黄素对照品相同保留时间处,未能检测出峰。

由参照物溶液与供试品溶液的制备方法可知,两者的制备方法不相同,参照物溶液省去水煎煮,直接采用醇提,而供试品的提取方法是先水煎煮后采用醇提法。从两者的相似度结果可知,两种提取方法相似度为1,故参照物溶液选用醇提法。

【检查】 参照《中国药典》2005年版一部附录Ⅰ C颗粒剂项下规定,对本品10批样品的【粒度】、【水分】、【溶化性】、【装量差异】、【微生物限度】进行了检查,结果上述各项均符合规定。

【浸出物】为进一步控制产品质量,根据何首乌的有效成分的化学性质,制定了【浸出物】测定项。采用乙醇作为溶剂,照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定,标准正文规定了取样量和稀释体积,以保证实验结果的重现性。对3批样品进行测定,结果见表5。

表5:醇溶性浸出物测定结果

批号

取样(g)

浸出物(%)

每批值(%)

平均值(%)

0901021

2.0186

40.20

40.1

40.6

2.0037

39.94

0905019

2.0054

40.80

40.7

2.0051

40.61

0908090

2.0180

40.76

40.9

2.0038

41.01

其余7批样品的测定结果分别为35.5%~45.1%,10批样品的测定结果的平均值为40.1%,按平均值的80%折算,暂定本品浸出物不得少于32.0%。

【含量测定】 本方法参考《中国药典》2010年版一部何首乌【含量测定】项下,测定2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的方法制定,并对提取方法进行优化,实验结果表明,该方法基本可行,具体说明如下:

具体说明如下:

    1、仪器与试药

1.1仪器:高效液相色谱仪:Waters2695-2489,Empower 2 Personal Single System SW 化学工作站;色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm);电子分析天平:BP-211D;超声提取器:CQ-25-6上海。

1.2试剂:乙腈为色谱纯,水为超纯水;其他试剂均为分析纯。

1.3试药:何首乌配方颗粒(批号:0612073、0702132、0703063、0706055、0710081、0801120、0807132、0901021、0905019、0908090;2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷(购于中国药品生物制品检定所)。

2、色谱条件及系统适应性 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(25∶75)为流动相;检测波长为320nm;柱温20℃;理论板数按2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2- O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。

3、溶液的制备

3.1对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时以上的2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品10.20mg,置50ml棕色容量瓶中,加甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,即得(每1ml含2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品0.204mg)。

3.2供试品溶液的制备  取本品粉末约0.2g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入稀乙醇50ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率50KHz)40分钟,放冷,再称定重量,加稀乙醇补足减失的重量,摇匀,离心,即得。

4、方法学验证

4.1准确度试验

取已知含量的同一批样品(批号:0905019 ,含量:3.80% )6份,每份取约0.1g,精密称定,分别精密加入2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液(浓度为0.8252mg/ml)4ml,按【含量测定】项下方法,制备供试品溶液,进样测定,计算回收率,结果见表6。

表6  准确度测定试验结果(n=6)

序号

供试品称样量(g)

供试品中2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的量(mg)

加入对照品的量(mg)

测得值(mg)

回收率%

平均%

RSD%

1

0.1013

3.8494

3.3008

7.0882

98.12

 

 

98.36

 

 

 

1.1

 

2

0.1008

3.8304

3.3008

7.0900

98.75

3

0.1005

3.8190

3.3008

7.0802

98.80

4

0.1009

3.8342

3.3008

7.0428

97.21

5

0.0997

3.7886

3.3008

7.0916

100.07

6

0.1002

3.8076

3.3008

7.0174

97.24

由上表可知本法回收率良好,适合作为本品的含量测定。

4.2 精密度试验

4.2.1重复性试验

取同一批号何首乌配方颗粒(0905019),按【含量测定】项下方法制备供试品溶液6份,分别测定2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰含量,结果见表7。

表7  重复性试验结果(n=6)

NO

含量(%)

平均(%)

RSD%

1

3.78

3.80

0.8

2

3.82

3

3.83

4

3.83

5

3.76

6

3.78

由上表可知本法重复性良好,符合含量测定的要求。

4.2.2精密度试验:取重复性项下的一份供试品溶液,按上述色谱条件,重复进样6次,测定2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰面积,结果见表8。          

表8 精密度试验结果

NO

2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰面积

RSD%

1

2984193

0.2

2

2969622

3

2974496

4

2982692

5

2980870

6

2974401

由上表可知本法精密度良好,符合含量测定的要求。

4.3 专属性试验

取样品按含量测定项下的方法处理及测定。结果表明,样品图谱在与2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品图谱相同保留时间相同,结果见图8:

阴性样品

2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品

何首乌配方颗粒

图8专属性试验

4.4 线性关系

精密吸取上述2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液1、2、4、8、12、16μl,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积积分值对2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进样量进行回归处理,回归方程为Y=3870000X+15000,r=0.999759,结果见图9。

           图9. 2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷标准曲线图

实验结果表明2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进样量在0.204~3.264μg范围内呈良好的线性关系。

4.5稳定性考察

取同一何首乌配方颗粒(批号:0905019)供试液,按上述色谱条件,分别于0,2,4,6,8,10,12小时进样,测定2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰面积。结果见表9,结果表明2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在12小时内稳定。

表9 稳定性试验结果


时间(h)

0

2

4

6

8

12

RSD(%)

峰面积

2973228

2939310

2936053

2960624

2960567

2957060

0.5


5、样品含量测定

取10批何首乌配方颗粒,按拟定含量测定方法操作,测定结果见表10。

表10 样品含量测定结果

批号

含量1(mg/袋)

含量2(mg/袋)

平均含量(mg/袋)

0612073

29.66

29.20

29.4

0702132

29.35

29.03

29.2

0703063

29.68

30.05

29.9

0706055

30.16

30.64

30.4

0710081

29.21

29.12

29.2

0801120

28.22

28.28

28.3

0807132

28.31

28.74

28.5

0901021

30.12

30.21

30.2

0905019

30.33

30.11

30.2

0908090

28.15

28.34

28.2

 

6、 含量限度的确定

由上表可知本品10批样品含量稳定,含量测定数据平均为29.35 mg/袋,含量限度按测定结果平均值的90%计算,因此暂定含量限度为每袋含何首乌以2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C20H22O9)计,不得少于26.0mg。

【性味与归经】、【功能与主治】如正文,与何首乌饮片标准一致。

【用法与用量】如正文.

【规格】 根据生产工艺、临床用药情况,确定何首乌配方颗粒的包装规格为每袋装*g,相当于*g饮片。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

广东省药品检验所

二零一零年六月

  评论这张
 
阅读(638)| 评论(0)
推荐 转载

历史上的今天

在LOFTER的更多文章

评论

<#--最新日志,群博日志--> <#--推荐日志--> <#--引用记录--> <#--博主推荐--> <#--随机阅读--> <#--首页推荐--> <#--历史上的今天--> <#--被推荐日志--> <#--上一篇,下一篇--> <#-- 热度 --> <#-- 网易新闻广告 --> <#--右边模块结构--> <#--评论模块结构--> <#--引用模块结构--> <#--博主发起的投票-->
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

页脚

网易公司版权所有 ©1997-2017